Количка
Медицина, основана на доказателства - Ортопедия - Естетична медицина - Спортна медицина
Фотоактивирана PRP (PA-PRP): механизми, доказателства и практически аспекти
Научен преглед на фотобиомодулацията, кинетиката на освобождаване и публикуваните проучвания
Резюме
В някои протоколи PRP се обработва със светлина с определени параметри след подготовката. Разлики в кинетиката на освобождаване са описани in vitro в сравнение с методите за химическо активиране. Дали и до каква степен тези разлики имат клиничен ефект, засега не е ясно поради ограничената и разнородна ситуация на изследванията. Малки клинични проучвания съобщават за индикации за разлики в отделни крайни точки (напр. гонартроза, мелазма); от това не могат да се направят методологически издържани заключения. В допълнение към протоколите за активиране, стандартизацията на подготовката и изборът на подходящи PRP туби също са от значение за практическата класификация. Тази статия обобщава текущото състояние на механизма, аспектите на подготовката и публикуваните данни.
Основни изводи
- В някои протоколи PRP се обработва след подготовка с помощта на светлина с определени параметри.
- In vitro са описани разлики в кинетиката на освобождаване в сравнение с методите на химическо активиране; клиничното значение на тези разлики все още не е окончателно изяснено.
- Малките клинични проучвания дават индикации за възможни разлики в отделните крайни точки; надеждни заключения са възможни само в ограничена степен поради ограничения брой случаи и разнородните протоколи.
- Сравнимостта на публикуваните данни зависи до голяма степен от стандартизираните протоколи за обработка - все още не са установени единни, общозадължителни стандарти.
- За други области на приложение (тендинопатии, неврорегенерация, хронични рани) до момента са налични предклинични или методологично разнородни данни.
01Биологичен механизъм на действие
1.1 Фотобиомодулация и вътреклетъчна сигнална каскада
Когато обработената PRP се изложи на полихроматични източници на светлина с определени диапазони на излъчване, хромофорите на тромбоцитите - включително цитохром с оксидазата в митохондриалната дихателна верига - абсорбират енергията на фотоните. Полихроматичните светлинни източници с определени диапазони на излъчване са описани в публикуваните протоколи. Това инициира каскада от вътреклетъчни събития:
- Повишен митохондриален синтез на АТФ
- Повишено вътреклетъчно освобождаване на Ca²⁺ от плътната тубулна система
- Маркери за структурно активиране: разширяване на ламелиподиите, образуване на пилоподии, агломерация на тромбоцитите
Тези маркери за активиране са морфологично сравними с конвенционално активираните тромбоцити. Описани са разлики в кинетиката на освобождаване в сравнение с методите за химическо активиране in vitro. Директното им пренасяне в клинични условия е възможно само в ограничена степен.
1.2 Растежни фактори, описани в PRP, и техните обсъждани биологични функции
| Растежен фактор | Основен източник | Обсъдена биологична функция |
|---|---|---|
| PDGF (AA, AB, BB) | α-гранули | Пролиферация на фибробласти и гладкомускулни клетки; набиране на тъканни прогениторни клетки |
| TGF-β1/β2 | α-гранули | Синтез на колаген, ремоделиране на белези; имунна модулация чрез инхибиране на провъзпалителните цитокини |
| VEGF | α-гранули | Ангиогенеза; решаваща за васкуларизацията на аваскуларни структури (сухожилия, менискуси) |
| EGF | α-Granula | Епителна пролиферация и миграция; има значение за затварянето на рани и дермалната регенерация |
| IGF-1 | α-гранули / плазма | Пролиферация на миобласти; мускулна регенерация след нараняване |
| HGF | α-Granula | Антиапоптотичен; подпомага регенерацията на мускулните клетки |
Таблица 1: Растежни фактори, описани в PRP, и техните обсъждани биологични функции (опростено). Концентрациите варират в зависимост от протокола на приготвяне и индивидуалните изходни стойности.
1.3 Статус на левкоцитите: LR-PRP спрямо LP-PRP
Съдържанието на левкоцити в препарата е методологично важен параметър, чието значение се обсъжда в зависимост от показанията и целевата тъкан:
- LR-PRP (богата на левкоцити): Може да е свързано с различен клетъчен и цитокинов профил и по-изразена провъзпалителна сигнализация.
- LP-PRP (беден на левкоцити): Обсъжда се при определени условия, когато се желае по-нисък съпътстващ възпалителен профил.
Клиничната значимост зависи от показанията, препарата, целевата тъкан и крайната точка.
Бележка относно ситуацията с данните: Понастоящем няма достатъчно директни сравнения между LR и LP подготовка за PA-PRP. В наличните проучвания са използвани специфични търговски системи; преносимостта към други протоколи е ограничена.
02Стандартизация на обработката: каква роля играят PRP тръбите?
Възпроизводимостта на приготвянето на PA-PRP зависи от няколко пре-аналитични и процедурни параметри. Съществени променливи накратко:
| Параметри | Характеристики на протокола, описани в литературата | Значение за подготовката |
|---|---|---|
| Обем на кръвната проба | 15-60 ml (в зависимост от показанията, различни в публикуваните проучвания) | По-големите обеми могат да бъдат свързани с по-голям добив на тромбоцити; оценката остава зависима от системата и протокола |
| Центрофугиране | Двуетапно центрофугиране, често описвано в публикуваните протоколи (меко въртене + твърдо въртене) | Отделяне на еритроцити и евентуално на левкоцити; точните стойности на g зависят от системата |
| Концентрация на тромбоцитите | Зависи от системата; няма установени общозадължителни прагови стойности | Целевата концентрация варира в зависимост от системата, индикацията и протокола |
| Фотоактивиране | Описани в публикувани протоколи; специфични за системата | Специфичните параметри (дължина на вълната, време на облъчване, разстояние) все още не са унифицирани |
| Антикоагулант | ACD-A или цитрат, описани в публикуваните протоколи | EDTA обикновено не се използва в протоколите за приготвяне на PRP |
| Време на кандидатстване | Незабавно прилагане след активиране, описано в публикуваните протоколи | Съхранение на активирани препарати, което не е предвидено в публикуваните проучвания |
Таблица 2: Практически параметри за приготвяне на PA-PRP. Необходими са специфични за устройството валидации.
За значението на Епруветки за PRP за стандартизация: Епруветките за PRP са важен компонент на преданалитичната стандартизация, тъй като материалът, обемът на пълнене, антикоагулантът, системата за разделителен гел и геометричните свойства могат да повлияят на клетъчния профил и възпроизводимостта на препарата. Следователно при оценката на публикуваните данни трябва да се вземе предвид не само самата процедура за PRP, но и използваната система от епруветки.
Понастоящем няма задължителна европейска стандартизация на производството на PRP (включително PA-PRP). Съществуват консенсусни препоръки на ISBT и различни професионални асоциации, но те нямат задължителна регулаторна сила.
03Ситуация с доказателствата: публикувани данни от проучвания накратко
Отделни малки проучвания и систематичен преглед описват индикации за разлики в сравнение със стандартни протоколи или сравнителни групи за определени крайни точки. Цялостната значимост остава ограничена поради ограничения брой случаи, разнородните протоколи, частично липсващите контролни групи и непоследователните крайни точки.
3.1 Гонартроза
Paterson и съавтори (2016 г.) сравняват вътреставно инжектирана PA-PRP с хиалуронова киселина в двойно сляпо, рандомизирано пилотно проучване (n = 37). Отчетени са разлики за индивидуалните оценки на болката и функцията в групата на PA-PRP. Значимостта и възможността за пренасяне са значително ограничени от малкия брой случаи, специфичната търговска система и краткото проследяване.
В проспективно кохортно проучване (n = 232, 12 месеца) Mohiuddin и сътр. (2018) съобщават за промени в оценката на WOMAC през периода на наблюдение. Липсата на контролно рамо фундаментално ограничава интерпретацията на резултатите.
В систематичен преглед и метаанализ (Simental-Mendía и др., 2023; n = 1292, 14 проучвания) е изследвана активирана спрямо неактивирана PRP като цяло - не е включен анализ на специфична за PA-PRP подгрупа. Директната екстраполация към PA-PRP не е методологически допустима.
3.2 Дерматология: Мелазма
Demir и Altun (2024) сравняват PA-PRP с конвенционална PRP в рандомизирано двойно-сляпо проучване (n = 38). И при двете групи се наблюдават промени в резултата по MASI; не е доказана статистически значима групова разлика. Броят на случаите не е достатъчен за надеждни заключения.
3.3 Данни in vitro за кинетиката на освобождаване
Лабораторно изследване (Eur. J. Pharm. Biopharm., 2020 г.) описва разлики в освобождаването на растежен фактор в условия in vitro за период на наблюдение от 28 дни след фотоактивиране. Данните in vitro не могат да се прехвърлят директно към условията in vivo; тъканната перфузия, ензимната среда и свързващите протеини значително променят ефективното разпределение на лекарството.
3.4 Допълнителни полета за индикация
Данни за PRP от разнородни проучвания са налични за тендинопатии, андрогенна алопеция и хронични рани; за тези показания до голяма степен липсват специфични контролирани проучвания на PA-PRP. В областта на неврорегенерацията са публикувани само предклинични данни.
04Често задавани въпроси относно класификацията на PA-PRP
Фотоактивираната PRP (PA-PRP) е процедура, при която богатата на тромбоцити плазма се излага на светлина с определени параметри след подготовката. Това е вариант на приготвяне на PRP; методологичните и клиничните разлики с други процедури за активиране са предмет на текущи изследвания.
При химическото активиране към приготвената PRP се добавят екзогенни вещества (напр. CaCl₂ или говежди тромбин). При фотоактивирането това добавяне се пропуска; вместо това препаратът се излага на светлина с определени параметри. Разликите в кинетиката на освобождаване са описани in vitro. Дали тези разлики са от клинично значение, не може да се прецени категорично въз основа на наличните проучвания.
Публикуваните данни за PA-PRP са хетерогенни и методологически ограничени. Съществуващите проучвания са предимно с малък брой случаи, използват различни протоколи и понякога нямат контролно рамо. От това не могат да се направят надеждни заключения, свързани с индикациите. Очаква се провеждането на по-големи, стандартизирани RCT.
Епруветките за PRP могат да повлияят на състава на получения препарат - например чрез антикоагуланта, системата за разделяне на гела, обема на пълнене и съвместимостта на процеса. За съпоставимостта на протоколите и оценката на публикуваните данни тези параметри трябва да бъдат документирани и систематично отчитани.
Различните протоколи за центрофугиране, системи от епруветки, съдържание на левкоцити и светлинни параметри водят до препарати, които трудно могат да бъдат сравнени. Тъй като в публикуваните проучвания често се използват различни системи, преносимостта на резултатите е ограничена. Стандартизираните протоколи са предпоставка за надеждни становища относно ефикасността.
Основните отворени въпроси включват: клиничната значимост на описаните in vitro разлики в освобождаването; оптималните светлинни параметри и тяхното стандартизиране; свързаната с индикациите ефикасност в контролирани проучвания с достатъчен брой случаи; дългосрочната безопасност; и възможността за прехвърляне на резултатите в различни системи за лечение.
05Класификация на ситуацията с данните и необходимостта от изследване
Въпреки предклиничните и механичните данни, наличните данни за PA-PRP са ограничени поради методологични причини:
- Малки проби: Най-голямото проучване, специфично за PA-PRP, до момента (Mohiuddin et al., n=232) няма контролно рамо с рандомизирани резултати.
- Липса на стандартизация: Различните системи за приготвяне, съдържание на левкоцити и източници на светлина затрудняват съпоставимостта.
- Кратки периоди на проследяване: Липсват данни за дългосрочна безопасност (>12 месеца).
- Пристрастие към публикацията: Положителните резултати се публикуват с предимство, а отрицателните проучвания са слабо представени в литературата за PRP.
За бъдещи изследвания са необходими широкомащабни, многоцентрови RCT със стандартизирани протоколи за лечение, валидирани крайни точки и дългосрочно проследяване, за да могат да се оценят свързаните с индикациите твърдения по методологически по-стабилен начин.
Научни справки
- Paterson KL et al. Вътреставно инжектиране на фотоактивирана богата на тромбоцити плазма при пациенти с остеоартрит на коляното: двойно-сляпо, рандомизирано контролирано пилотно проучване. BMC Musculoskelet Disord. 2016;17:67.
- Mohiuddin AKM et al. Клиничен резултат от фотоактивирана плазма, богата на тромбоцити, при лечение на остеоартрит на коляното. Regen Med Ther. 2018;4(1):2-4.
- Simental-Mendía M et al. Сравнение на клиничната ефективност на активирана и неактивирана богата на тромбоцити плазма при лечението на остеоартрит на коляното: систематичен преглед и мета-анализ. Clin Rheumatol. 2023;42(3):681-690.
- Demir FT, Altun E. Сравнение на ефикасността на богатата на тромбоцити плазма с и без фотоактивация при мелазма: рандомизирано двойно-сляпо проучване. J Cosmet Dermatol. 2024. doi:10.1111/jocd.16540
- Устойчиво освобождаване на растежни фактори от фотоактивиран PRP. Eur J Pharm Biopharm. 2020;148:67-76.
- Cavallo C et al. Плазма, богата на тромбоцити: Изборът на метод за активиране влияе върху освобождаването на биоактивни молекули. Biomed Res Int. 2016;2016:6591717.
- Фотоактивирана плазма, богата на тромбоцити, базирана на специфична за пациента биомастило за хрущялно тъканно инженерство. Biomed Mater. 2020;15(6).
Техническа бележка В тази статия е направена научна категоризация на публикуваните данни за фотоактивираната PRP. Тя е написана за лекари и медицински специалисти. Представянето има за цел да предостави професионална класификация на ситуацията с публикуваните проучвания и не позволява никакви обобщени изявления за клинично превъзходство или конкретни резултати от лечението.