Stockage à long terme de PRP : progrès, stabilité et avenir de la médecine régénérative

Stockage à long terme de PRP : progrès, stabilité et avenir de la médecine régénérative

Durée de vie du PRP : temps de traitement, conditions de stockage et modifications biologiques

La composition du PRP en fait un produit fragile. Les plaquettes et les facteurs de croissance tels que le PDGF (platelet-derived growth factor), le VEGF (vascular endothelial growth factor) et le TGF-β (transforming growth factor-beta) sont des molécules bioactives qui peuvent se dégrader ou devenir inactives si elles ne sont pas stockées correctement. De plus, le stockage du PRP peut entraîner une libération incontrôlée des facteurs de croissance, ce qui réduit son efficacité lors de son utilisation.

1. Dans quel délai le PRP doit-il être traité après la centrifugation ?

Après l'obtention de PRP par centrifugation, le temps est un facteur critique. Les plaquettes, qui constituent la principale source de facteurs de croissance, ne restent actives et intactes que pendant une période limitée. Si le PRP n'est pas traité ou appliqué à temps, les plaquettes perdent leur fonction et les facteurs de croissance commencent à se dégrader.

1.1 Temps de traitement

  • Non réfrigéré (température ambiante, 20-25 °C) :
    • Le PRP doit idéalement être utilisé dans les 30 minutes à 2 heures maximum après la centrifugation afin de garantir une efficacité bioactive totale.
    • Après 2 heures, l'activation des thrombocytes commence spontanément, ce qui entraîne une libération incontrôlée de facteurs de croissance. Ces facteurs de croissance ne sont stables que pendant une période limitée avant d'être dégradés.

  • Réfrigéré (4 °C) :
    • Conservé à 4 °C, le PRP peut rester stable jusqu'à 4-6 heures. Le refroidissement ralentit le métabolisme des plaquettes et réduit l'activation spontanée.
    • Cependant, un stockage prolongé à 4 °C entraîne une diminution des facteurs de croissance et une altération de l'intégrité des plaquettes.

2. Processus biologiques dans le PRP après centrifugation

Après la production de PRP, différents processus biologiques commencent à influencer sa stabilité et son efficacité. Ces processus concernent aussi bien les thrombocytes que les facteurs de croissance et les protéines dissous.

2.1 Activation des thrombocytes

  • Après la centrifugation, les thrombocytes se trouvent dans un état de dormance.
  • En l'absence de stimulation appropriée (par exemple par du chlorure de calcium ou de la thrombine), les plaquettes peuvent s'activer spontanément en quelques heures.

  • Conséquence de l'activation :
    • Libération de facteurs de croissance tels que le PDGF (platelet-derived growth factor), le VEGF (vascular endothelial growth factor) et le TGF-β (transforming growth factor-beta) d'une manière incontrôlée.
    • Une fois libérés, ces facteurs de croissance commencent à se dégrader rapidement, ce qui compromet l'efficacité thérapeutique du PRP.

2.2 Dégradation des facteurs de croissance

  • Les facteurs de croissance libérés après l'activation des plaquettes sont des protéines sensibles qui sont dégradées par les enzymes et le stress oxydatif.
  • À température ambiante, ces facteurs peuvent perdre leur concentration de manière significative en 4 à 6 heures.

2.3 Modification des composants cellulaires

Les membranes plaquettaires commencent à se déstabiliser en cas de stockage prolongé, notamment à des températures supérieures à 4 °C. Cela conduit à :

  • Perte d'intégrité cellulaire.
  • Libération d'enzymes intracellulaires qui affectent davantage la stabilité des composants du PRP.

2.4 Processus oxydatifs et enzymatiques

  • Le stress oxydatif (dû à l'oxygène et aux radicaux libres) peut endommager les protéines et les lipides du PRP.
  • Des enzymes comme les protéases et les peroxydases présentes dans le plasma contribuent à la dégradation des facteurs de croissance et des protéines.

3. Durée de vie du PRP dans différentes conditions de stockage

Le stockage des PRP est essentiel pour préserver leur efficacité bioactive. Voici les différentes conditions de stockage et leur influence sur la durée de conservation :

3.1 Non réfrigéré (température ambiante, 20-25 °C) :

  • Durée de conservation : de 30 minutes à 2 heures.
  • À température ambiante, l'activation spontanée des plaquettes commence rapidement, ce qui entraîne une perte des substances bioactives.
  • Après 2 heures, la plupart des facteurs de croissance sont libérés et commencent à se dégrader.

3.2 Réfrigéré (4 °C) :

  • Durée de conservation : 4-6 heures.
  • La réfrigération ralentit le métabolisme des thrombocytes et réduit leur activation.
  • La libération et la dégradation des facteurs de croissance sont ralenties, mais le PRP ne reste pas stable plus de 6 heures à 4°C.

3.3 Congelé (-20 °C) :

  • Durée de conservation : jusqu 'à 3 mois.
  • La congélation à -20 °C maintient la concentration des facteurs de croissance pendant plusieurs semaines, voire plusieurs mois. Les thrombocytes peuvent toutefois être endommagés par la formation de cristaux de glace, ce qui affecte leur intégrité.

3.4 Congelé (-80 °C) :

  • Durée de conservation : 6-12 mois.
  • À -80 °C, la plupart des facteurs de croissance et des protéines restent stables. Cependant, les plaquettes perdent leur intégrité cellulaire et donc leur capacité à libérer activement des facteurs de croissance.
  • Le PRP conservé à -80 °C est particulièrement adapté aux applications dans lesquelles les facteurs de croissance sont utilisés dans le plasma lui-même (par exemple, pour le traitement des lésions tissulaires).

3.5 Cryoconservation (-196 °C, azote liquide) :

  • Durée de conservation : 12 mois ou plus.
  • La cryoconservation à -196 °C est la meilleure méthode pour garantir la stabilité à long terme du PRP. Elle préserve la fonctionnalité bioactive des facteurs de croissance et réduit les dommages aux plaquettes grâce à l'utilisation d'agents cryoprotecteurs tels que le DMSO.

4. Recommandations pour la pratique

Le stockage des PRP est essentiel pour préserver leur efficacité bioactive. Voici les différentes conditions de stockage et leur influence sur la durée de conservation :

4.1 Traitement et utilisation du PRP fraîchement préparé

  • Préparez le PRP dès que possible après la centrifugation et utilisez-le dans les deux heures pour obtenir des résultats optimaux.
  • Si une utilisation immédiate n'est pas possible, conservez le PRP au réfrigérateur à 4 °C, mais pas plus de 6 heures.

4.2 Si le stockage est nécessaire

  • Utiliser des méthodes de stockage appropriées (par ex. -20 °C ou moins) si le PRP doit être conservé pour des utilisations ultérieures.
  • Si le PRP est congelé, veillez à utiliser des cryoprotecteurs afin de minimiser les dommages cellulaires causés par les cristaux de glace.

4.3 Décongélation du PRP stocké

  • Le PRP doit être décongelé en douceur, par exemple à température ambiante ou dans un bain-marie à 37 °C maximum.
  • Évitez une décongélation rapide à haute température, car cela peut endommager les protéines et les plaquettes.

5. Conclusion

La durée de conservation du PRP dépend fortement des conditions de stockage et du temps qui s'écoule entre la fabrication et l'utilisation. Idéalement, le PRP fraîchement préparé doit être utilisé dans les deux heures pour garantir sa pleine efficacité bioactive. Pour un stockage plus long, les conditions réfrigérées ou congelées (4 °C à -80 °C) constituent une solution viable. Le PRP congelé à -80 °C ou cryoconservé à -196 °C peut rester stable pendant des mois, mais il est surtout adapté aux traitements de suivi planifiés. Une manipulation et une documentation soigneuses sont essentielles pour garantir la qualité du PRP et donc le succès du traitement.

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